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濕熱滅菌法介紹以及濕熱滅菌驗證講解

返回列表 來源: 發布日期: 2020.03.08

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過濾除菌法??筛鶕粶缇锲返奶匦圆捎靡环N或多種方法組合滅菌。只要產品允許,應盡可能選用最終滅菌法(即產品分裝至包裝容器后再滅菌)滅菌。若產品不適合采用最終滅菌法,可選用過濾除菌法或無菌生產工藝達到無菌保證要求,只要可能,應對非最終滅菌的產品作補充性滅菌處理(如流通蒸汽滅菌)。

濕熱滅菌驗證
      常用的濕熱滅菌驗證:主要是對產品、滅菌設備和裝載方式的驗證。驗證活動包括:對照滅菌設備設計的滅菌參數來校核滅菌器的性能、建立某產品滅菌程序及裝載方式的有效性和重現性、估計滅菌過程中產品可能發生的變化。(濕熱滅菌 (118-134℃)——蒸汽、過熱水)。另一種常用的干熱滅菌驗證:主要用于內包裝用的玻璃容器或金屬制品的滅菌和去熱源,所使用的滅菌程序應通過驗證試驗。(干熱滅菌(160-320 ℃)——熱空氣 )。
      濕熱滅菌的目的是通過一系列驗證試驗提供足夠的數據和文件依據,從而找到最有效最合理的滅菌參數,并把已經驗證過的飽和蒸汽滅菌設備和滅菌工藝參數應用到產品生產的除菌過程中去,以證明用于藥品生產過程中的每一臺飽和蒸汽滅菌設備過程和滅菌效果具有可靠性和重現性。主要適用于能耐受高溫、高壓飽和蒸汽的產品。
      濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質及核酸變形導致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂,當氫鍵斷裂時,蛋白質及核酸內部結構被破壞,進而喪失了原有功能。蛋白質及核酸的這種變形可以是可逆的,也可以是不可逆的。雖然無所謂動能行結構被破壞,若氫鍵破裂的數量未達到微生物死亡的臨界值,則其分子很可能恢復到它原有的形式,微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質變形,如采用高壓蒸汽滅菌時,就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續時間,這對滅菌效果十分重要。高溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質變形,在規定操作條件下,蛋白質發生變形的過程即微生物死亡的過程,是可預見和重復的。微生物的滅活符合一級動力學方程,微生物死亡速率是微生物耐熱參數D和殺滅時間的函數。即在給定的時間下被滅活的微生物與仍然存活數成正比。
      濕熱滅菌工藝驗證時,應進行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點;在空載條件下,確認121℃時腔室各點的溫度差值應<1℃;使用插入實際物品或模擬物品內的溫度探頭,確認滅菌柜在不同裝載時,最冷點物品的標準滅菌時間(F。)達到設定的標準;用生物指示劑進一步確認在不同裝載時冷點處的滅菌物品達到無菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。
1、熱分布試驗的操作:
      空載狀態下的熱分布試驗:
①整個滅菌腔室內的溫度探頭應均勻分布,將水平和垂直區均覆蓋在內;
②說明溫度探頭在腔室內的數量及位置,并有圖示;
③在排水口處,在靠近設備本身的溫度傳感/控制器的位置,應再放置一支探頭;
④在滅菌溫度穩定期,各處溫度應基本保持一致(如各點之間的溫度差在1℃范圍內);
⑤重復試驗至少3次,以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現性、并且與規定標準相符;
⑥每種裝載方式下的熱分布試驗;
⑦在產品容器內以及腔室均勻放置測溫探頭以確定在裝載狀態下升溫緩慢的位置。此試驗應在最大和最小裝載方式下分別進行。
       測定不同裝載方式對產品的熱力學效果的影響,通過實驗應得到以下參數:
①保溫階段的最高和最低溫度(溫度范圍)及平均溫度;
②最小和最大F。值;
③保溫時間。復試驗裝載3次,以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現性、并且與規定標準相符。
2、熱穿透試驗:
      通過在產品容器內均勻分布測溫探頭以確定在滅菌時相應裝載方式下的冷點。應分別在最大和最小裝載方式下進行此試驗,以確定不同裝載方式對被滅菌物品的熱力學效果的影響,通過實驗應能獲得如下數據:
①各點間的最大和最低溫度(溫度范圍);
②保溫階段各點的平均溫度、各點的最小及最大F。值、以及各點的保溫時間。
     通過熱穿透試驗應達到以下目的:
①測試數據應證明,在滅菌保溫階段整個腔室內各容器?內的溫度應不超過士1℃,各容器內溫度之間的最大溫差應不超過2℃;
②根據滅菌參數確定合適的產品滅菌程序;
③至少連續運行3次,以確保設定滅菌程序的穩定性和可靠性。
       熙邁(上海)科技服務有限公司是一家專注從事第三方檢測驗證的服務公司,主要服務對象是以新藥研發,生物技術,醫療等行業為主的企事業單位客戶,服務內容主要是提供涉及溫濕度類和潔凈度類儀器,房間的檢測驗證。

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